Novel Coronavirus (SARS-CoV-2) Multiplex Real-Time PCR Kit
Dieses hochempfindliche, gebrauchsfertige PCR-Kit ist in lyophilisierter Form (Gefriertrocknungsverfahren) für die Langzeitlagerung erhältlich.Das Kit kann bei Raumtemperatur transportiert und gelagert werden und ist ein Jahr haltbar.Jedes Röhrchen mit Vormischung enthält alle Reagenzien, die für die PCR-Amplifikation benötigt werden, einschließlich Reverse-Transkriptase, Taq-Polymerase, Primer, Sonden und dNTPs-Substrate.Es müssen nur 13 ul destilliertes Wasser und 5 ul extrahierte RNA-Vorlage hinzugefügt werden, dann kann es auf den PCR-Instrumenten ausgeführt und amplifiziert werden.
Das qPCR-Gerät sollte die folgenden Anforderungen erfüllen:
1. Passen Sie ein 8-Streifen-PCR-Röhrchen mit einem Volumen von 0,2 ml an
2. Mehr als vier Erkennungskanäle haben:
| Kanal | Anregung (nm) | Emission (nm) | Vorkalibrierte Farbstoffe |
| 1. | 470 | 525 | FAM, SYBR Grün I |
| 2 | 523 | 564 | VIC, HEX, TET, JOE |
| 3. | 571 | 621 | ROX, TEXAS-ROT |
| 4 | 630 | 670 | CY5 |
PCR-Plattformen:
7500 Echtzeit-PCR-System, Biorad CF96, iCycler iQ™ Echtzeit-PCR-Erkennungssystem, Stratagene Mx3000P, Mx3005P
Die Schwierigkeit des Kühlkettentransports des neuartigen Coronavirus-Nukleinsäure-Nachweisreagens
Wenn herkömmliche Nukleinsäure-Nachweisreagenzien über große Entfernungen transportiert werden, ist die Lagerung und der Transport in der Kühlkette (-20±5) ℃ erforderlich, um sicherzustellen, dass die Bioaktivität des Enzyms in den Reagenzien aktiv bleibt.Um sicherzustellen, dass die Temperatur den Standard erreicht, werden mehrere Kilogramm Trockeneis für jede Kiste mit Nukleinsäure-Testreagenz benötigt, sogar weniger als 50 g, aber es kann nur zwei oder drei Tage halten.Aus Sicht der Industriepraxis beträgt das tatsächliche Gewicht der von den Herstellern ausgegebenen Reagenzien weniger als 10 % (oder weit weniger als dieser Wert) des Behälters.Das meiste Gewicht kommt von Trockeneis, Kühlakkus und Schaumstoffkisten, daher sind die Transportkosten extrem hoch.
Im März 2020 begann COVID-19 im Ausland in großem Umfang auszubrechen, und die Nachfrage nach Nukleinsäure-Nachweisreagenzien von Novel Coronavirus stieg dramatisch an.Trotz der hohen Kosten für den Export der Reagenzien in der Kühlkette können die meisten Hersteller dies aufgrund der großen Menge und des hohen Gewinns noch akzeptieren.
Mit der Verbesserung der nationalen Exportpolitik für Antipandemieprodukte sowie der Verbesserung der nationalen Kontrolle über den Personenfluss und die Logistik kommt es jedoch zu einer Verlängerung und Unsicherheit bei der Transportzeit von Reagenzien, was zu erheblichen Produktproblemen führte durch den Transport.Eine verlängerte Transportzeit (Transportzeit von etwa einem halben Monat ist sehr üblich) führt zu häufigen Produktausfällen, wenn das Produkt den Kunden erreicht.Dies hat die meisten Exportunternehmen für Nukleinsäurereagenzien beunruhigt.
Lyophilisierte Technologie für PCR-Reagenzien half beim weltweiten Transport von Nukleinsäure-Nachweisreagenzien für das neuartige Coronavirus
Die lyophilisierten PCR-Reagenzien können bei Raumtemperatur transportiert und gelagert werden, was nicht nur die Transportkosten senken, sondern auch die durch den Transportprozess verursachten Qualitätsprobleme vermeiden kann.Daher ist die Lyophilisierung des Reagenz der beste Weg, um das Problem des Exporttransports zu lösen.
Die Lyophilisierung beinhaltet das Einfrieren einer Lösung in einen festen Zustand und das anschließende Sublimieren und Abtrennen des Wasserdampfs unter Vakuumbedingungen.Der getrocknete gelöste Stoff verbleibt mit der gleichen Zusammensetzung und Aktivität im Behälter.Im Vergleich zu herkömmlichen flüssigen Reagenzien weist das von Liming Bio hergestellte lyophilisierte Vollkomponenten-Nukleinsäure-Nachweisreagenz für neuartige Coronavirus die folgenden Eigenschaften auf:
Extrem starke Hitzestabilität:Es kann einer Behandlung bei 56 ° C für 60 Tage standhalten, und die Morphologie und Leistung des Reagens bleiben unverändert.
Lagerung und Transport bei normaler Temperatur:keine Kühlkette erforderlich, keine Lagerung bei niedriger Temperatur vor dem Entsiegeln erforderlich, den Kühlraum vollständig freigeben.
Einsatzbereit:Gefriertrocknung aller Komponenten, keine Systemkonfiguration erforderlich, Vermeidung des Verlusts von Komponenten mit hoher Viskosität wie Enzyme.
Multiplex-Targets in einem Röhrchen:Das Nachweisziel umfasst das ORF1ab-Gen, das N-Gen und das S-Gen des neuartigen Coronavirus, um die Virusgenovaration zu vermeiden.Um falsch-negative Ergebnisse zu reduzieren, wird das humane RNase-P-Gen als interne Kontrolle verwendet, um den klinischen Bedarf an Probenqualitätskontrolle zu decken.
