Welches ist die beste Methode?
—Tests zur SARS-CoV-2-Infektionsdiagnose
Bei bestätigten COVID-19-Fällen wurden als häufige klinische Symptome Fieber, Husten, Myalgie oder Müdigkeit gemeldet.Diese Symptome sind jedoch keine einzigartigen Merkmale von COVID-19, da diese Symptome denen anderer virusinfizierter Krankheiten wie der Grippe ähneln.Derzeit sind Real-Time-PCR (rt-PCR), Virus-Nukleinsäure-Real-Time-PCR, CT-Bildgebung und einige hämatologische Parameter die primären Werkzeuge für die klinische Diagnose der Infektion.Viele Labortestkits wurden von der chinesischen CDC entwickelt und zum Testen von Patientenproben auf COVID-19 verwendet1, US-CDC2und andere Privatunternehmen.Der IgG/IgM-Antikörpertest, eine serologische Testmethode, wurde ebenfalls als diagnostisches Kriterium in Chinas aktualisierte Version der Diagnose- und Behandlungsrichtlinien für die neuartige Coronavirus-Krankheit (COVID-19) aufgenommen, die am 3. März herausgegeben wurde1.Der Virus-Nukleinsäure-rt-PCR-Test ist nach wie vor das aktuelle diagnostische Standardverfahren zur Diagnose von COVID-19.
Starker Schritt®Novel Coronavlrus (SARS-COV-2) Multiplex Real-Time PCR Kit (Nachweis für drei Gene)
Diese Echtzeit-PCR-Testkits, die nach genetischem Material des Virus suchen, beispielsweise in Nasen-, Mund- oder Analabstrichen, leiden jedoch unter vielen Einschränkungen:
1) Diese Tests haben lange Bearbeitungszeiten und sind in der Durchführung kompliziert;Sie brauchen im Durchschnitt über 2 bis 3 Stunden, um Ergebnisse zu erzielen.
2) Die PCR-Tests erfordern zertifizierte Labors, teure Ausrüstung und geschulte Techniker, um sie durchzuführen.
3) Es gibt einige falsch negative Ergebnisse für die rt-PCR von COVID-19.Es kann an der niedrigen SARS-CoV-2-Viruslast in der Abstrichprobe der oberen Atemwege liegen (neuartiges Coronavirus infiziert hauptsächlich die unteren Atemwege, wie z. B. Lungenbläschen), und der Test kann keine Personen identifizieren, die eine Infektion durchgemacht haben, sich erholt haben und das Virus aus ihrem Körper entfernt.
Forschung von Lirong Zou et al4stellten fest, dass kurz nach dem Einsetzen der Symptome höhere Viruslasten festgestellt wurden, wobei in der Nase eine höhere Viruslast als im Rachen festgestellt wurde und das Muster der viralen Nukleinsäureausscheidung bei mit SARS-CoV-2 infizierten Patienten dem von Patienten mit Influenza ähnelt4und sieht anders aus als bei Patienten, die mit SARS-CoV-2 infiziert sind.
Yang Panet al5untersuchten Serienproben (Rachenabstriche, Sputum, Urin und Stuhl) von zwei Patienten in Peking und stellten fest, dass die Viruslast in Rachenabstrich- und Sputumproben etwa 5–6 Tage nach Beginn der Symptome ihren Höhepunkt erreichte, Sputumproben zeigten im Allgemeinen eine höhere Viruslast als Rachenabstrichproben.In Urin- oder Stuhlproben dieser beiden Patienten wurde keine virale RNA nachgewiesen.
Der PCR-Test ergibt nur dann ein positives Ergebnis, wenn das Virus noch vorhanden ist.Die Tests können keine Personen identifizieren, die eine Infektion durchgemacht, sich erholt und das Virus aus ihrem Körper entfernt haben.Tatsächlich waren bei Patienten mit klinisch diagnostizierter neuartiger Coronavirus-Pneumonie nur etwa 30 % bis 50 % PCR-positiv.Viele Patienten mit neuartiger Coronavirus-Pneumonie können aufgrund eines negativen Nukleinsäuretests nicht diagnostiziert werden, sodass sie nicht rechtzeitig die entsprechende Behandlung erhalten können.Von der ersten bis zur sechsten Ausgabe der Richtlinien, die sich ausschließlich auf die Diagnose von Nukleinsäuretestergebnissen stützten, was den Klinikern große Probleme bereitete. Der früheste „Whistleblower“, Dr. Li Wenliang, ein Augenarzt in Wuhan Central Krankenhaus, ist tot.Im Laufe seines Lebens hatte er drei Nukleinsäuretests bei Fieber und Husten, zuletzt PCR-positiv.
Nach Expertendiskussion wurde entschieden, Serumtestmethoden als neues diagnostisches Kriterium zu erweitern.Während Antikörpertests, auch serologische Tests genannt, bestätigen können, ob jemand infiziert war, selbst nachdem sein Immunsystem das Virus beseitigt hat, das COVID-19 verursacht.
StrongStep® SARS-COV-2 IgG/IgM-Antikörper-Schnelltest
Der IgG/IgM-Antikörpertest wird dazu beitragen, auf viel bevölkerungsbezogenerer Weise nachzuvollziehen, wer die Infektion hatte, da viele Fälle anscheinend von asymptomatischen Patienten übertragen werden, die nicht leicht identifiziert werden können.Ein Paar in Singapur, der Ehemann wurde positiv per PCR getestet, das PCR-Testergebnis seiner Frau war negativ, aber die Ergebnisse des Antikörpertests zeigten, dass sie Antikörper hatte, ebenso wie ihr Ehemann.
Serologische Assays müssen sorgfältig validiert werden, um sicherzustellen, dass sie zuverlässig reagieren, aber nur auf Antikörper gegen das neuartige Virus.Eine Sorge war, dass die Ähnlichkeit zwischen den Viren, die das schwere akute respiratorische Syndrom verursachen, und COVID-19 zu einer Kreuzreaktivität führen könnte.Das von Xue Feng Wang entwickelte IgG-IgM6wurde als Point-of-Care-Test (POCT) angesehen, da er in der Nähe des Krankenbettes mit Blut aus der Fingerbeere durchgeführt werden kann.Das Kit hat eine Sensitivität von 88,66 % und eine Spezifität von 90,63 %.Es gab jedoch immer noch falsch positive und falsch negative Ergebnisse.
In Chinas aktualisierter Version der Diagnose- und Behandlungsleitlinie für die neuartige Coronavirus-Krankheit (COVID-19)1, werden bestätigte Fälle als Verdachtsfälle definiert, die eines der folgenden Kriterien erfüllen:
(1) Atemwegsproben, Blut- oder Stuhlproben, die mittels rt-PCR positiv auf SARS-CoV-2-Nukleinsäure getestet wurden;
(2) Die genetische Sequenzierung von Viren aus Atemwegs-, Blut- oder Stuhlprobenproben ist hochgradig homolog mit dem bekannten SARS-CoV-2;
(3) Neue Coronavirus-spezifische IgM-Antikörper und IgG-Antikörper im Serum waren positiv;
(4) Der neuartige Coronavirus-spezifische IgG-Antikörper im Serum, der während der Erholungsphase von negativ auf positiv geändert wurde, oder der Coronavirus-spezifische IgG-Antikörper ist 4-mal höher als während der akuten Phase.
Diagnose und Behandlung von COVID-19
| Richtlinien | Veröffentlicht | Bestätigte diagnostische Kriterien |
| Fassung 7 | 3. März 2020 | ❶ PCR ❷NGS ❸ IgM+IgG |
| Fassung 6 | 18.02.2020 | ❶ PCR ❷NGS |
Bezug
1. Leitlinien zur Diagnose und Behandlung der neuartigen Coronavirus-Pneumonie (Studienversion 7, Nationale Gesundheitskommission der Volksrepublik China, herausgegeben am 3. März 2020)
http://www.nhc.gov.cn/yzygj/s7652m/202003/a31191442e29474b98bfed5579d5af95.shtml
2. Forschung verwendet nur das Echtzeit-RT-PCR-Protokoll zur Identifizierung von 2019-nCoV
https://www.cdc.gov/coronavirus/2019-ncov/lab/rt-pcr-detection-instructions.html
3. Singapur behauptet, erstmals einen Antikörpertest zur Verfolgung von Coronavirus-Infektionen eingesetzt zu haben
https://www.sciencemag.org/news/2020/02/singapore-claims-first-use-antibody-test-track-coronavirus-infections
4. SARS-CoV-2-Viruslast in Proben der oberen Atemwege infizierter Patienten 19. Februar 2020 DOI: 10.1056/NEJMc2001737
5. Viruslasten von SARS-CoV-2 in klinischen Proben Lancet Infect Dis 2020 Online veröffentlicht am 24. Februar 2020 (https://doi.org/10.1016/S1473-3099(20)30113-4)
6. Entwicklung und klinische Anwendung eines kombinierten IgM-IgG-Antikörper-Schnelltests für SARS-CoV-2
Infektionsdiagnose XueFeng Wang ORCID iD: 0000-0001-8854-275X
Postzeit: 17. März 2020
